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--- bioinfo:참조_서열에_대한_매핑_reference_mapping_및_시각화 [2023/08/11 09:13] – [Mapping의 실제] hyjeong
+++ bioinfo:참조_서열에_대한_매핑_reference_mapping_및_시각화 [2024/07/05 10:04] (current) – [Mapping의 실제] hyjeong
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   $ samtools view -b -S -o BL21.bam BL21.sam
-SAM 파일의 대부분을 구성하는 read alignment 필드에서 두 번째 필드(flag, 0-255 범위의 숫자)는 read의 mapping 상태를 비트 단위로 나타낸다. 특정 flag를 만족하는 alignment를 추출하려면 samtools view -f INT를, 만족하지 않는 것을 추출하려면 samtools -view -F INT 명령을 사용하면 된다. Reference에 반복 서열이 존재하면 하나의 read가 여러 곳에 붙어서 각각 별도의 alignment를 생성하게 되므로(primary vs. secondary alignment), mapped read의 수치와 관련된 작업을 하려면 주의가 필요하다. 뿐만 아니라 chimeric alignment인 경우에도 하나의 read가 representative 및 supplementary alignment로 여러 차례 나타날 수 있다. SAM flags를 해독하려면 ‘samtools flags 4’와 같이 입력하거나 Decoding SAM flags 웹사이트를 이용하라. 예를 들어 0x04는 segment unmmaped를 의미한다. ‘0x’는 16진수임을 명시하기 위한 것이다(예: 10 = 0xa). [[https://gist.github.com/jvhaarst/9643139|getinsersize.py]]는 매핑 데이터를 분석하여 라이브러리 크기에 대한 정보를 제공한다.
+SAM 파일의 대부분을 구성하는 read alignment 필드에서 두 번째 필드(flag, 0-255 범위의 숫자)는 read의 mapping 상태를 비트 단위로 나타낸다. 특정 flag를 만족하는 alignment를 추출하려면 samtools view -f INT를, 만족하지 않는 것을 추출하려면 samtools -view -F INT 명령을 사용하면 된다. Reference에 반복 서열이 존재하면 하나의 read가 여러 곳에 붙어서 각각 별도의 alignment를 생성하게 되므로(primary vs. secondary alignment), mapped read의 수치와 관련된 작업을 하려면 주의가 필요하다. 뿐만 아니라 chimeric alignment인 경우에도 하나의 read가 representative 및 supplementary alignment로 여러 차례 나타날 수 있다. SAM flags를 해독하려면 ‘samtools flags 4’와 같이 입력하거나 Decoding SAM flags 웹사이트를 이용하라. 예를 들어 0x04는 segment unmmaped를 의미한다. ‘0x’는 16진수임을 명시하기 위한 것이다(예: 10 = 0xa). [[https://gist.github.com/jvhaarst/9643139|getinsersize.py]]는 매핑 데이터를 분석하여 라이브러리 크기에 대한 정보를 제공한다. 이 스크립트에 대한 상세한 설명은 [[https://allaboutbioinfo.blogspot.com/2012/04/estimating-paired-end-read-insert.html|Estimating paired-end read insert length from SAM/BAM files]]를 참조하라.
   $ samtools flagstat BL21.bam