application_of_pacbio_long_reads_sequencing_technology
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| * [[https:// | * [[https:// | ||
| - | ===== phh5tools | + | ===== pbh5tools |
| A Swiss-army knife for interrogating PacBio HDF5 files (cmp.h5, bas.h5) | A Swiss-army knife for interrogating PacBio HDF5 files (cmp.h5, bas.h5) | ||
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| * https:// | * https:// | ||
| * https:// | * https:// | ||
| - | --readType은 ccs, subreads, unrolled. ccs는 bas.h5 파일 내부에 ccs read가 있는 경우에 뽑아낸다. unrolled는 어떤 것인지 잘 모르겠다. | + | * **bash5tools.py** can extract read sequences and quality values for both Raw and circular consensus sequencing (CCS) readtypes and use create fastq and fasta files. |
| + | * **cmph5tools.py**는 PacBio Alignment File Format(cmp.h5, | ||
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| + | --readType은 ccs, subreads, unrolled. ccs는 bas.h5 파일 내부에 ccs read가 있는 경우에 뽑아낸다. unrolled는 어떤 것인지 잘 모르겠다. | ||
| $ bash5tools.py input.bas.h5 --outFilePrefix myreads --outType fasta --readType subreads --minReadScore 0.75 | $ bash5tools.py input.bas.h5 --outFilePrefix myreads --outType fasta --readType subreads --minReadScore 0.75 | ||
| + | Analysis Results 서브디렉토리에 있는 p0.[1-3].subreads.fast{a|q} 파일의 수치와 bash5tools.py를 이용해서 bas.h5 파일로부터 추출한 read의 수치를 비교해 보았다. 2번 항목부터 bash5tools.py를 이용한 것이다. | ||
| + | |||
| + | - subreads.fastq 전체: 1339659706 bp / 124615 seqs; 10750.4 average length | ||
| + | - (--readType unrolled): 1395878244 bp / 101548 seqs; 13746.0 average length | ||
| + | - (--readType subreads): 1394529365 bp / 131741 seqs; 10585.4 average length | ||
| + | - (--readType subreads --minReadScore 0.7): 1347690522 bp / 126271 seqs; 10673.0 average length | ||
| + | - (--readType subreads **--minReadScore 0.75**): 1339662407 bp / 124756 seqs; 10738.3 average length | ||
| + | - (--readType subreads --minReadScore 0.8): 1287559618 bp / 118740 seqs; 10843.5 average length | ||
| + | - (--readType subreads --minReadScore 0.85): 1038658565 bp / 92346 seqs; 11247.5 average length | ||
| + | - (--readType subreads --minReadScore 0.9): 654807 bp / 121 seqs; 5411.6 average length | ||
| + | - (--readType subreads --minReadScore 0.95): no sequence extracted! | ||
| + | |||
| + | --minReadScore가 0.9에 근접하면서 결과물의 분량이 현저히 떨어진다. --minReadScore 0.75로 하는 것이 Analysis Results 서브디렉토리에 있는 subreads file의 분량과 거의 흡사하다. | ||
| ===== SMRT analysis ===== | ===== SMRT analysis ===== | ||
| * SMRT analysis system requirements [[http:// | * SMRT analysis system requirements [[http:// | ||
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